1. FINALIDADE 5. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁRIOS (porém não
Os Multidiscos de Antibióticos Laborclin consistem em unidades
plásticas às quais estão aderidos 12 discos de papel com
diâmetro de 6 mm, impregnados com antibióticos para uso em
antibiograma por difusão em ágar (placas de 140 mm de
- Alças bacteriológicas em platina (códigos LB 570658 e 570659)
diâmetro) segundo a Técnica de Kirby & Bauer.
ou descartáveis 0,01 mL (cód. LB 670188);
- Ágar Muel er Hinton em placas de 14 cm (cód. LB 542518) e
2. INTRODUÇÃO
A metodologia de Kirby & Bauer para antibiograma é a mais
- Tubo com escala 0,5 Mac Farland e solução salina estéril (NaCl
difundida e utilizada até hoje pela sua simplicidade de execução e
baixo custo em relação a outras metodologias.
- Swabs estéreis para espalhamento da suspensão;
3. AMOSTRA 6. PROCEDIMENTO TÉCNICO
Colônias puras provenientes de cultivo bacteriano de 18-24h.
Retirar as placas e as unidades com os multidiscos da geladeira
cerca de 20-30 minutos para que adquiram a temperatura
As amostras mantêm-se viáveis para a execução das análises até
cerca de 24h de cultivo. Além deste prazo, deve-se fazer repique
a- Com uma alça bacteriológica em platina devidamente flambada
da cepa, cultivar por mais 24h para depois proceder ao exame.
e resfriada, tocar 4-5 colônias da bactéria em análise com 18-
24h de cultivo a 35 oC em meio apropriado;
As amostras que já ultrapassaram o prazo máximo de
b- Suspender as colônias em solução fisiológica estéril (NaCl
estabilidade devem ser rejeitadas apara a análise, devendo ser
0,85%) até se obter uma turvação compatível com o grau 0,5 da
repicadas em meio apropriado, e usadas as colônias que
surgirem após 18-24h de incubação no repique.
c- Embeber um swab estéril na suspensão bacteriana,
comprimindo-o contra as paredes do tubo para tirar o excesso, e
4. INFORMAÇÕES GERAIS SOBRE O PRODUTO
semear em seguida de forma suave em todas direções na placa,
d- Aguardar (não mais que 15 minutos) a superfície do ágar
O processo consiste em se preparar uma suspensão de bactérias
de cultivo recente, inocular esta suspensão na superfície de uma
e- Com auxílio de uma pinça flambada, colocar a unidade de
placa de Muel er Hinton Ágar, e depois adicionar as unidades de
multidiscos sobre a superfície do meio inoculado, exercendo uma
multidisco. Após a incubação em estufa, é analisado o padrão de
leve pressão com a ponta da pinça para uma boa adesão dos
crescimento ou inibição ao redor de cada disco, sendo então
medido o tamanho de cada halo e o resultado pesquisado em
f- Incubar a placa com os discos em estufa bacteriológica a 35 oC
tabelas apropriadas segundo a espécie bacteriana em análise.
Unidades plásticas embaladas individualmente contendo discos
Com o auxílio de uma régua, paquímetro ou dispositivo
de papel impregnados com antibióticos de forma a cada disco
semelhante, medir o diâmetro dos halos inibitórios de cada disco,
apresentar uma concentração padronizada. Cada disco possui
e consultar uma tabela apropriada para determinar se a bactéria
impresso em uma de suas faces seu código e o valor numérico de
em análise é sensível ou não ao antibiótico testado.
sua concentração. No verso encontra-se uma tabela contendo a
formulação dos discos, código, concentração, halos esperados e
Precauções e cuidados especiais
- Seguir padronização técnica para execução da prova (CLSI);
- O Meio de Muel er Hinton utilizado deve estar com pH e
composição química adequada (íons cálcio, íons magnésio,
Este material pode permanecer em temperatura ambiente por um
timina e timidina) conforme as normas da CLSI;
prazo máximo de 3 dias para fins de transporte. No laboratório ao
- As placas devem ter espessura entre 3-5 mm não podendo ser
se receber o material, colocar imediatamente nas condições
inferiores a 3 mm ou superiores a 5 mm (respectivamente
indicadas de armazenamento, em geladeira (2-8oc) ou freezer (-
provocam resultados falsamente aumentados ou diminuídos);
10 °C), condição em que não ocorrendo contaminação microbiana
- Inóculos mais carregados (acima do padrão 0,5 da escala Mac
ou umidificação, o produto se manterá estável até a data de
Farland) fornecem resultados Falsamente diminuídos e inóculos
mais fracos resultados falsamente aumentados;
- A pré-incubação da placa em estufa por 5 minutos após a
d- Precauções e cuidados especiais
inoculação com o swab é importante para remover o excesso de
- Usar pinças estéreis para manipulação dos multidiscos, nunca
umidade, que pode causar a difusão errática do antibiótico após a
- Não deixar o produto desnecessariamente exposto por longos
- Observar critérios para escolha dos antibióticos apropriados
períodos em temperatura ambiente (pode haver inativação do
- Aguardar para que os materiais atinjam a temperatura ambiente
- Após sua abertura se o produto não for utilizado, deverá ser
- Observar a espessura do meio, pois se a camada for muito
- O produto destina-se ao uso diagnóstico in vitro;
espessa os halos diminuem, e se for muito delgada, os halos
- O material usado deverá ser descartado após sua esterilização
pelo calor úmido a 121 oC (autoclave) por 20 minutos. Para
- O uso de swabs a base de algodão não é recomendado pela
acondicionamento do material usado, recomendamos o uso do
possibilidade dos ácidos graxos naturais presentes no material
- Não se deve usar materiais com o prazo de validade expirado,
- A temperatura de incubação deve ser rigorosamente controlada;
ou que apresentem selo de qualidade rompido ou violado.
- O tempo de incubação indicado não deve ser nem abreviado
nem aumentado sob risco de se obterem resultados falsamente
diminuídos (pouco tempo) ou falsamente aumentados (mais
7. CONTROLE DA QUALIDADE
Cepas padrão ATCC ou derivadas (UTILIZADAS ATÉ O QUINTO
11. APRESENTAÇÃO
REPIQUE). São recomendadas para a rotina:
- Escherichia coli ATCC 25922; 640663 - Multidisco Urina, caixa com 25 unidades contendo os
- Staphylococcus aureus ATCC 25923;
seguintes antibióticos: Ácido nalidíxico, Ampicilina, Cefalotina,
- Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853
Cefepime, Ciprofloxacin, Gentamicina, Levofloxacin, Norfloxacin,
Nitrofurantoína, Sulfazotrim, Cloranfenicol e Tetraciclina;
Testar cada novo lote em uso com a cepa padrão (substituindo a
640664 - Multidisco Gram Positivo, caixa com 25 unidades
amostra por esta) e em periodicidade definida pelo laboratório
contendo os seguintes antibióticos: Cefepime, Ciprofloxacin,
Cloranfenicol, Clindamicina, Eritromicina, Gentamicina, Oxacilina,
Espera-se que cada cepa testada produza um halo inibitório
dentro dos limites estabelecidos para controle.
640665 - Multidisco Gram Negativo, caixa com 25 unidades
Considerando que após aberto o frasco a tendência do antibiótico
contendo os seguintes antibióticos: Ampicilina, Amicacina,
é de ter sua potência diminuída com o passar do tempo, é normal
Amoxicilina + clavulanato, Ceftazidima, Cefepime, Cefoxitina,
o decréscimo dos valores dos halos de inibição. Uma vez que os
Cefuroxima, Ciprofloxacin, Gentamicina, Meropenem, Cefalotina e
valores atinjam pontos muito próximos ou inferiores aos limites
mínimos preconizados, recomenda-se que os discos sejam
Resultados alterados no controle de qualidade implicam em
Obtenha junto ao site www.laborclin.com.br as tabelas completas
revisão completa de todos os componentes do sistema analítico.
contendo resultados esperados de controle de qualidade e dos
Nestas circunstâncias não se recomenda a liberação dos
halos inibitórios esperados para os principais grupos bacterianos.
resultados até que sejam investigadas as causas do desvio de
8. GARANTIA DA QUALIDADE
A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Código de
Defesa do Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor
- que o usuário conheça e siga rigorosamente o presente
- que os materiais estejam sendo armazenados nas condições
- que os equipamentos e demais acessórios necessários estejam
em boas condições de uso, manutenção e limpeza.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto é
submetido a testes específicos, que são repetidos periodicamente
conforme calendário estabelecido pela empresa até a data de
vencimento expressa em rótulo. Os certificados de análise de
cada lote podem ser obtidos no site www.laborclin.com.br. Em
caso de dúvidas ou quaisquer problemas de origem técnica,
entrar em contato com o SAC - Serviço de Assessoria ao Cliente
sac@laborclin.com.br. Quaisquer problemas que inviabilizem uma
boa resposta do produto, que tenham ocorrido comprovadamente
por falha da Laborclin serão resolvidos sem ônus ao cliente,
9. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1-Performance Standards for antimicrobic disc suceptibility testes
National Commitee for Clinical Laboratory Standards 1979.
2-Gutiérrez, A. E., Importância del medio de cultivo sobre el
tamaño del halo de inibición en las pruebas de susceptibilidad a
los antibióticos. Investigación Médica Internacional (1977) 4,
3-Organización Mundial de la salud. Standardization of methods
for conducting microbic sensitivity testes. Second report of the
Who technical report series nº 210, Geneve, 1961.
10. REGISTRO NA ANVISA: 10097010128 Laborclin Produtos para Laboratórios Ltda
CNPJ 76.619.113/0001-31 Insc. Estadual 1370012926
R.Cassemiro de Abreu, 521 - Pinhais/PR CEP 83.321-210
Telefone 041 36619000- www.laborclin.com.br
Resp. Tec. Elisa Hizuru Uemura - CRFPR4311
SOUTHERN PARK COUNTY FIRE PROTECTION DISTRICT Meeting Minutes for Aug, 4, 2011 Public Meeting 1) Call to order: Chairman Calanni called meeting to order at 7:05PM 2) Introduction of Guests : None 3) Attendees: Board members Sam Calanni, Amy Mason and Harry Gintzer. Board members Anita Long and Flip Boettcher had excused absences. Also present were Board Secretary Roberta
Deze puzzel is typisch een telg uit een grote spellenfamilie. De leDen van Deze familiehebben een specifieke geometrische trek gemeen: een kubus maken van onregelmatigemaar zeer uitgesproken componenten Die bestaan uit kleinere kubusjes. • Vermenigvuldiging van een eenheid De kubus De Kubus is een groot blok van 3 x 3 x 3 blok-jes. U maakt hem van zeven holle stukken diebestaan uit